DNA甲基化檢測技術(shù)服務(wù)—BSP法

    DNA甲基化是表觀遺傳修飾的主要方式，能在不改變DNA序列的前提下啊鸭，改變遺傳表現(xiàn)锹淌。一般說來，DNA的甲基化會抑制基因的表達(dá)赠制。DNA的甲基化對維持染色體的結(jié)構(gòu)赂摆、X染色體的失活、基因印記和腫瘤的發(fā)生發(fā)展都起著非常重要的作用钟些。

 BSP法原理

       用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA烟号，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變政恍。隨后設(shè)計BSP引物進(jìn)行PCR汪拥，在擴(kuò)增過程中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶，**對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷CpG位點是否發(fā)生甲基化稱為BSP-直接測序方法篙耗。如將PCR產(chǎn)物克隆至載體后進(jìn)行測序迫筑，可以提高測序成功率，這種方法稱為BSP-克隆測序法宗弯。

（一）服務(wù)內(nèi)容
    1脯燃、基因組DNA的Bisulfite轉(zhuǎn)化。
    2蒙保、DNA甲基化檢測——基于BSP（Bisulfite sequencing PCR）法辕棚。
    3、本公司所用試劑全為進(jìn)口試劑邓厕，實驗全程質(zhì)量保證逝嚎。

（二）樣品要求
    1、細(xì)胞（≥10⁶ 個）详恼、組織（≥300mg）补君、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等樣品材料昧互；基因組DNA（體積≥50μl赚哗，濃度≥50 ng/μl）她紫；
    2、目的基因信息或genebank序列號屿储；

 （三）終產(chǎn)品
    1贿讹、BSP-直接測序方法：Bisulfite處理的基因組DNA；測序峰圖及實驗報告够掠。
    2民褂、BSP-克隆測序方法：Bisulfite處理的基因組DNA；陽性克隆質(zhì)粒疯潭；測序峰圖及實驗報告赊堪。

 （四）服務(wù)周期
    1、BSP-直接測序方法：1~2周
    2竖哩、BSP-克隆測序方法：2~4周

 （五）關(guān)于引物

       在基于Bisulfite 轉(zhuǎn)化的DNA甲基化檢測的方法中哭廉，引物是實驗成功的關(guān)鍵因素，且因檢測的目的基因片段的不同相叁，合適引物的存在與否有較大的不確定性遵绰，請盡量采用經(jīng)過驗證的引物，如需DNA甲基化檢測引物設(shè)計服務(wù)增淹，價格另議椿访。